DiD 高氯酸鹽 (細(xì)胞膜紅色熒光探針)

保存條件 Store at -20℃, protect from light.DiD，DiO，DiI，DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng)，這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色，這類染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散，最佳濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏色區(qū)分明顯：DiI（橙色熒光），DiO（綠色熒光），DiD（紅色熒光）和 DiR （深紅色熒光）這使得他們可以用來對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標(biāo)準(zhǔn)的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā)，有著比DiI更長的激發(fā)波長和發(fā)射波長，在細(xì)胞和組織染色中更有價(jià)值。 DiR的紅外熒光可以穿透細(xì)胞和組織，在活體成像中用來示蹤。

DiD perchlorate

CAS號(hào)：127274-91-3

純度：＞95%

Ex/Em: 644/663nm 推薦濾光器（Filter）: XF47-Omega, 31023-Chroma

儲(chǔ)存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。

溶解性：可溶于無水乙醇、DMSO和DMF，其中在DMSO中溶解度大于10mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時(shí)可以適當(dāng)加熱，并用超聲處理以促進(jìn)溶解。

DiD 高氯酸鹽 (細(xì)胞膜紅色熒光探針)

使用方法

1. DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細(xì)胞膜染色液制備

（1）配置DMSO或EtOH 儲(chǔ)存液：儲(chǔ)存液用 DMSO或EtOH配置濃度1～5 mM。

注意：未使用的儲(chǔ)存液保存在-20 oC，避免反復(fù)凍融。

（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲(chǔ)存液，配制濃度為1～5 µM的工作液。

注意：工作液的最終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)來配制?？梢詮耐扑]濃度的十倍以上尋找最佳條件。

2. 懸浮細(xì)胞染色

（1）懸浮細(xì)胞密度為 1 × 106/mL加入到工作液中。

（2）在37 ℃培養(yǎng)細(xì)胞 2～20分鐘，不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。

（3）染色細(xì)胞試管在1000～1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。

（4）傾倒上清液，再次緩慢加入預(yù)溫37℃的培養(yǎng)液。

（5）重復(fù)（3），（4）步驟兩次以上。

3. 粘壁細(xì)胞的染色

（1）使粘壁的細(xì)胞在無菌實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。

（2）從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，吸走過量培養(yǎng)液，將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。

（3）在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液，輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。

（4）在37 ℃培養(yǎng)細(xì)胞 2～20分鐘，不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。

（5）吸干染料工作液，用培養(yǎng)液洗蓋玻片2～3次，每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞，培養(yǎng)5～10分鐘，然后吸干培養(yǎng)基。

4. 顯微鏡檢測

（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。

（2）多色染料的同時(shí)檢測，濾光器按照以下設(shè)定：

a） DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b） DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c） DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005

5. 流式細(xì)胞儀的檢測

DiD，DiO，DiI，DiR和DiS 染色的細(xì)胞可以分別用經(jīng)典的FL1，F(xiàn)L2，F(xiàn)L3和FL4流式細(xì)胞儀檢測。

關(guān)于我們

Bioss（博奧森）于2001年在北京成立，是一家擁有自主品牌，集免疫學(xué)科研試劑研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的國家高新技術(shù)企業(yè)。自成立之初，公司始終秉持“自主研發(fā)、原始創(chuàng)新"的經(jīng)營理念，為生命科學(xué)研究提供高質(zhì)量的科研抗體，診斷抗體原料，免疫學(xué)輔助試劑，以及CRO服務(wù)。

Bioss Inc.于2010年在美國波士頓設(shè)立了面向全球抗體市場的商務(wù)拓展及國際市場營銷總部，不斷擴(kuò)展全球銷售體系，主打Bioss國際品牌，向全球科研工作者提供高質(zhì)量的科研抗體產(chǎn)品。迄今為止，Bioss產(chǎn)品已遍布全球多個(gè)國家和地區(qū)，并已成為數(shù)家歐美抗體公司的OEM合作伙伴。

二十年的探索和拼搏，為Bioss品牌在免疫學(xué)試劑領(lǐng)域奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。我們?cè)诿绹⒅袊?、德國、日本分別建有現(xiàn)貨庫存，為生命科學(xué)研究提供更及時(shí)的服務(wù)。

做值得信賴的抗體生產(chǎn)商

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Bioss公司自成立以來就非常重視抗體的驗(yàn)證，建立了嚴(yán)格的抗體生產(chǎn)、質(zhì)檢質(zhì)控體系，并密切關(guān)注生物醫(yī)學(xué)的前沿研究。2016年Bioss 啟動(dòng)了Knock Out（敲除）技術(shù)驗(yàn)證。不斷開發(fā)和提供特異性及性價(jià)比的研究工具，以滿足研究人員的需求。

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